ELISA實驗常見組織樣本處理方法

組織樣本一般是制成組織勻漿，處理方法如下：

1. 取適量組織塊，于預冷PBS（02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2. 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入 5-10ml預冷PBS(組織與 PBS 的質量體積比建議為 1:5，即1g 樣本加入 5ml PBS)進行充分研磨（有條件實驗室可選用機器勻漿），該過程需在冰上進行；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復凍融法可重復 2 次）。

3. 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5分鐘，留取上清即可檢測。

4. 如果樣本需要長期保存，請添加蛋白酶抑制劑。根據實驗需要，組織勻漿樣本可先定量總蛋白，以便于統計分析數據。某些組織樣本如肝臟，腎臟，腦組織會有假陽性反應。

樣本保存：

處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程，由于蛋白容易變性，降解，故該過程應盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要，尤其注意不要反復凍融，樣本處理之后可分裝密封保存，4℃保存應小于 1 周，-20℃不應超過 1 個月，-80℃不應超過2個月。在標本使用前應緩慢均衡至室溫，不應加熱使之融解。